Techniques d’analyses biologiques
Section outline
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Objectifs du cours:
1. Comprendre les concepts de solution, solubilité et saturation.
2. Savoir définir et calculer la concentration d'une solution.
3. Apprendre les méthodes de dilution pour préparer des solutions de concentrations spécifiques.
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Objectifs:
1. Savoir calculer la concentration molaire d’une espèce chimique en solution.
2. Savoir calculer la concentration massique d’une espèce chimique en solution.
3. Préparer une solution de concentration donnée par dissolution ou par dilution.
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Objectif du cours:
Apprendre les pratiques et les méthodes expérimentales importantes qui permettent de séparer les constituants des mélanges homogènes et hétérogènes.
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Objectifs:
1. Séparation d'un mélange Hétérogène par Décantation
2. Séparation d'un mélange hétérogène par Filtration
3. Séparation d'un mélange Homogène par Distillation
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Objectif du cours:
1. Expliquer le concept d’étalonnage et son importance dans l’analyse quantitative.
2. Les étudiants devraient être capables de déterminer la concentration inconnue d'un échantillon à partir de la courbe d'étalonnage, d'interpréter les résultats et d'utiliser l'échelle de teinte comme un complément visuel pour évaluer les concentrations.
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Objectifs:
À la fin de ce TD, les étudiants devraient être capables de comprendre et d'appliquer la méthode d'étalonnage ainsi que la loi de Beer-Lambert pour déterminer la concentration d'une substance en solution à l'aide de mesures d'absorbance par UV-visible.
1. Compréhension de la Loi de Beer-Lambert: Expliquer le principe de la loi de Beer-Lambert, qui établit la relation entre l'absorbance, la concentration d'une solution, et la longueur du chemin optique.
2. Établissement de la Courbe d'Étalonnage: Tracer la courbe d'étalonnage (absorbance vs concentration) à partir des données des solutions étalons. Déterminer l'équation de la droite de régression linéaire pour pouvoir extrapoler la concentration d'échantillons inconnus.
3. Calcul de la Concentration d'Échantillons : Appliquer l'équation de la droite régression linéaire pour déterminer la concentration d'échantillons inconnus en fonction de leur absorbance mesurée.
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Objectifs
1. Mettre en œuvre des méthodes d'extraction des pigments, comme l'utilisation de solvants organiques (ex : éthanol, acétone).
2. Utiliser des techniques spectrophotométriques pour mesurer l'absorbance des solutions extraites.
3. Calculer les concentrations des pigments en utilisant des équations fournies.
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Objectifs
1. Expliquer le principe de la méthode de Bradford, y compris le rôle du colorant Coomassie Brilliant Blue et son interaction avec les protéines.
2. Apprendre à préparer des échantillons de protéines et des solutions étalons de concentrations connues pour établir une courbe d’étalonnage.
3. Mesurer l'absorbance des solutions étalons à une longueur d'onde appropriée et tracer la courbe d'étalonnage pour relier absorbance et concentration de protéines.
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Objectifs du cours:
1. Fournir aux étudiants une compréhension approfondie des principes, des techniques et des applications de la chromatographie.
2. Assimiler les principes fondamentaux de la chromatographie, y compris les mécanismes de séparation et les phases impliquées.
3. Identifier et différencier les différents types de chromatographie (par exemple, chromatographie en phase gazeuse, chromatographie en phase liquide, chromatographie sur couche mince).
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Objectifs du cours
1. Comprendre le principe de la chromatographie sur couche mince CCM.
2. Savoir préparer et réaliser une chromatographie CCM.
3. Savoir révéler les taches incolores à l'aide de méthodes appropriées.
4. Savoir interpréter un chromatogramme et identifier les composants séparés.
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L'objectif
1. Comprendre le principe de la chromatographie (CCM).
2. Observer un échantillon naturellement coloré (pigments chlorophylliens) et visible à l'œil nu, ne nécessitant aucun procédé de révélation.
3. Identifier et séparer les différents pigments chlorophylliens présents dans les feuilles des plantes.
4. Observer les différences de mobilité des pigments.
5. Calculer le facteur de rétention (Rf).
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Objectifs du cours:
1. Comprendre les principes de l'électrophorèse: Expliquer les concepts de base, tels que la charge, la taille, la forme et la migration des molécules dans un champ électrique.
2. Électrophorèse sur papier: Apprendre les techniques de séparation des biomolécules sur papier. Discuter des applications et des limites de cette méthode.
3. Électrophorèse sur gel d'agarose: Comprendre le fonctionnement de l'électrophorèse sur gel d'agarose, particulièrement pour les acides nucléiques.
4. Électrophorèse sur gel d'amidon: Étudier les spécificités de l'électrophorèse sur gel d'amidon pour les protéines.
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Objectifs du cours:
Ce cours vise à fournir une compréhension complète des techniques d'électrophorèse PAGE, en mettant l'accent sur les différences entre la SDS-PAGE et la native PAGE, ainsi que sur leurs applications pratiques.
1. Comprendre les principes de la PAGE : Expliquer le fonctionnement général de l'électrophorèse sur gel de polyacrylamide et son importance dans l'analyse des protéines.
2. Différencier SDS-PAGE et native PAGE: Identifier les différences fondamentales entre SDS-PAGE et native PAGE, notamment en termes de dénaturation, de charge et de conformation des protéines.
3. SDS-PAGE: Comprendre le rôle du SDS dans la dénaturation des protéines et la création d'une charge négative uniforme. Analyser les applications de la SDS-PAGE, notamment pour déterminer le poids moléculaire et évaluer la pureté des protéines.
4. Native PAGE: Étudier le principe de conservation de la structure des protéines en native PAGE.
5. Montage des gels: Apprendre à préparer et à monter des gels de polyacrylamide pour les deux techniques (SDS-PAGE et native PAGE).
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Objectifs du cours:
1. Comprendre les principes de la 2D-PAGE : Expliquer le fonctionnement de l’électrophorèse bidimensionnelle.
2. Différencier les étapes de la méthode : Identifier les deux dimensions de séparation (point isoélectrique et taille) et leur importance dans l'analyse des protéines.
3. Acquérir des compétences pratiques : Apprendre à préparer des échantillons, à réaliser la 2D-PAGE et à visualiser les résultats.
4. Explorer les applications : Discuter des différentes applications de la 2D-PAGE en recherche.
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