Chapitre 5 : Électrophorèse
Section outline
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Objectifs du cours:
1. Comprendre les principes de l'électrophorèse: Expliquer les concepts de base, tels que la charge, la taille, la forme et la migration des molécules dans un champ électrique.
2. Électrophorèse sur papier: Apprendre les techniques de séparation des biomolécules sur papier. Discuter des applications et des limites de cette méthode.
3. Électrophorèse sur gel d'agarose: Comprendre le fonctionnement de l'électrophorèse sur gel d'agarose, particulièrement pour les acides nucléiques.
4. Électrophorèse sur gel d'amidon: Étudier les spécificités de l'électrophorèse sur gel d'amidon pour les protéines.
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Objectifs du cours:
Ce cours vise à fournir une compréhension complète des techniques d'électrophorèse PAGE, en mettant l'accent sur les différences entre la SDS-PAGE et la native PAGE, ainsi que sur leurs applications pratiques.
1. Comprendre les principes de la PAGE : Expliquer le fonctionnement général de l'électrophorèse sur gel de polyacrylamide et son importance dans l'analyse des protéines.
2. Différencier SDS-PAGE et native PAGE: Identifier les différences fondamentales entre SDS-PAGE et native PAGE, notamment en termes de dénaturation, de charge et de conformation des protéines.
3. SDS-PAGE: Comprendre le rôle du SDS dans la dénaturation des protéines et la création d'une charge négative uniforme. Analyser les applications de la SDS-PAGE, notamment pour déterminer le poids moléculaire et évaluer la pureté des protéines.
4. Native PAGE: Étudier le principe de conservation de la structure des protéines en native PAGE.
5. Montage des gels: Apprendre à préparer et à monter des gels de polyacrylamide pour les deux techniques (SDS-PAGE et native PAGE).
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Objectifs du cours:
1. Comprendre les principes de la 2D-PAGE : Expliquer le fonctionnement de l’électrophorèse bidimensionnelle.
2. Différencier les étapes de la méthode : Identifier les deux dimensions de séparation (point isoélectrique et taille) et leur importance dans l'analyse des protéines.
3. Acquérir des compétences pratiques : Apprendre à préparer des échantillons, à réaliser la 2D-PAGE et à visualiser les résultats.
4. Explorer les applications : Discuter des différentes applications de la 2D-PAGE en recherche.
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